DNA连接酶与聚合酶有什么区别呢?既然聚合酶是连接脱

编辑: admin           2017-04-03         

    DNA连接酶

    DNA连接酶 连接酶旧称“合成酶”

    DNA ligase

    DNA连接酶是1967年在三个实验室同时发现的.它是一种封闭DNA链上缺口酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5'-PO4与另一DNA链的3'-OH生成磷酸二酯键.但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外),而且必须是两条紧邻DNA链才能被DNA连接酶催化成磷酸二酯键.

    一般性质:大肠杆菌的DNA连接酶是一条分子量为75KD的多肽链.对胰蛋白酶敏感,可被其水解.水解后形成的小片段仍具有部份活性,可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物,但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成.DNA连接酶在大肠杆菌细胞中约有300个分子,和DNA聚合酶Ⅰ的分子数相近,这也是比较合理的现象.因为DNA连接酶的主要功能就是在DNA聚合酶Ⅰ催化聚合,填满双链DNA上的单链间隙后封闭DNA双链上的缺口.这在DNA复制、修复和重组中起着重要的作用,连接酶有缺陷的突变株不能进行DNA复制、修复和重组.

    噬菌体T4DNA连接酶分子也是一条多肽链,分子量为60KD,其活性很容易被0.2mol/L的KCl和精胺所抑制.此酶的催化过程需要ATP辅助.T4DNA连接酶可连接DNA-DNA,DNA-RNA,RNA-RNA和双链DNA粘性末端或平头末端.另外,NH4C1可以提高在大肠杆菌DNA连接酶的的催化速率,而对T4DNA连接酶则无效.无论是T4DNA连接酶,还是大肠杆菌DNA连接酶都不能催化两条游离的DNA链相连接.

    DNA聚合酶

    DNA聚合酶 ,以DNA为复制模板,从将DNA由5'端点开始复制到3'端的酶.

    在50年代的中期,A.Kornberg和他的同事们就想到DNA的复制必然是一种酶的催化作用,于是决心分离出这种酶并研究其结构和作用机制.为了达到这个目的,他们分离的蛋白,然后加到体外合成系统中即同位素标记的dNTP、Mg2+及模板DNA,经过大量的工作,于1956年终于发现了DNA聚合酶Ⅰ(DNA polymerase Ⅰ,DNA pol Ⅰ)原来称为Kornberg酶.以后又相续发现了DNA pol Ⅱ和DNA pol Ⅲ.开始人们以为DNA pol I是细菌中DNA复制主要的酶类,后来发现DNA pol Ⅰ的突变株照样可以复制,才清楚它并不是主角.现在已经知道在DNA复制中起主导作用的是DNA pol Ⅲ,至于pol Ⅱ的功能现在还不十分清楚.DNA聚合酶的共同特点是:

    (1)需要提供合成模板;(2)不能起始新的DNA链,必须要有引物提供3'-OH;(3)合成的方向都是5'→3'(4)除聚合DNA外还有其它功能.

    所有原核和真核的DNA聚合酶都具有相同的合成活性,都可以在3'-OH上加核苷酸使链延伸,其速率为1000 Nt/min.加什么核苷酸是根据和模板链上的碱基互补的原则而定的.

    E.coli的DNA pol Ⅰ涉及DNA损伤修复,在半保留复制中起辅助的作用.DNA pol Ⅱ在修复损伤中也是有重要的作用.DNA pol Ⅲ是一种多亚基的蛋白.在DNA新链的从头合成(de novo)中起复制酶的作用.

    DNA聚合酶(DNA polymerase)的主要活性是催化DNA的合成(在具备模板、引物、dNTP等的情况下)及其相辅的活性.

    真核细胞有4种DNA聚合酶.DNA聚合酶α位于细胞核内,有催化细胞增生的作用;DNA聚合酶β是小分子蛋白质(相对分子质量4.4*10 3),曾从小牛胸腺中提取,与细胞增生无关;DNA聚合酶γ的相对分子质量为100*10 3,其利用RNA为模板的效率比利用DNA为模板的效率高;其他的还有线粒体DNA聚合酶,催化线粒体DNA的合成.

    原核细胞有3种DNA聚合酶,都与DNA链的延长有关.DNA聚合酶I是单链多肽,可催化单链或双链DNA 的延长;DNA聚合酶II则与低分子脱氧核苷酸链的延长有关;DNA聚合酶III在细胞中存在的数目不多,是促进DNA链延长的主要酶.

    类似问题

    类似问题1:DNA聚合酶与DNA连接酶有什么区别?请主要从作用上辨析[生物科目]

    DNA聚合酶的作用是催化DNA的复制,即将原料脱氧核糖核苷酸 通过引物与模板链进行配对,合成新的DNA单链.

    DNA连接酶则是将两段分开的DNA链通过特定末端连接在一起.

    类似问题2:DNA连接酶与DNA聚合酶的功能及有什么区别?同上[生物科目]

    (1)DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核酸片段的3′末端的羟基上,形成磷酸二酯键;而DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键,不是在单个核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键.

    (2)DNA聚合酶是以一条DNA链为模板,将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链;而DNA连接酶是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来.因此DNA连接酶不需要模板.

    类似问题3:DNA连接酶和DNA聚合酶作用的区别那个是连接氢键的[生物科目]

    DNA连接酶是将两个DNA片段连接到一起,DNA聚合酶是在一个DNA片段或者RNA引物上逐个添加脱氧核苷酸.两个连接的都是磷酸二脂键.

    希望能帮到你

    类似问题4:DNA聚合酶和DNA连接酶有什么区别?答案不要太多也不能太少,可以使别处复制的,但是要准确,要点的,[生物科目]

    DNA聚合酶用于DNA复制,连接两条DNA单链行成一条DNA双链,作用于碱基对间的氢键;

    DNA连接酶用于基因工程,将目的基因连在载体(一般为质粒)上,作用于两脱氧核糖核苷酸间的磷酸二脂键.

    类似问题5:DNA聚合酶和连接酶有什么区别?请详细说明.“根据碱基互补配对原则,游离的碱基合成另外一条单链,一起拼成DNA双链”,游离的碱基合成另外一条单链,如何合成?[生物科目]

    DNA聚合酶是用于DNA复制,由一条DNA单链为模版,在DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则,游离的碱基合成另外一条单链,一起拼成DNA双链,这样原来的双链DNA分别分成了两个单链有各自合成了自己的互补单链,达到了复制...

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